需要把双手清洗干净，然后把采血针用酒精进行消毒，之后用采血针刺破皮肤，然后挤出一滴血放入加样区域，之后再加样区加入稀释的溶液，慢慢的加入，大概三滴左右就能让血液完全的渗透到加样区，需要等待二十分钟左右，如果检测区域和质控的区域都是红线的，这就证明体内有艾滋病毒，反之没有艾滋病毒。
艾滋试纸分为唾液检测试纸和血液试纸，其中病毒唾液检测试纸，用试纸从口腔的一端擦拭到另一端结束，然后沿下牙龈线擦拭至起始处，重复以上操作5-6次。将试纸采样端放入收集瓶，充分搅拌。血液试纸是首先用酒精棉擦拭待刺的手指和采血针。用采血针刺破手指，挤入两小滴血液到试纸的加样区，再加入2滴缓冲液到试纸的加样区。用酒精棉将手指破损处压住，并盖好采血针。等待20分钟左右，判读检测结果。
艾滋病初筛试验可能出现假阳性结果，即使结果为阳性，也不能诊断为艾滋病。可以在高危行为后两周、六周和三个月抽血检查艾滋病病毒抗体。如果他们都是负面的，他们可以被排除在外。
正规渠道购买的艾滋病检测试纸，准确率还是很高的，单次检测准确率可以高达95%以上。同一时间使用两种不同品牌试纸检出可以提高准确率，甚至可以达到99%以上。不过使用艾滋病试纸检测与操作手法有关，必须按照操作规程在适宜的条件下正确、规范的操作才能得到准确的结果。
艾滋病试纸的测试可以自己抽血或去医院。医院检测的技术水平肯定会更高。如果自己检查，是用酒精消毒手指，然后用干棉签擦拭，然后刺破采血针，挤出一滴血并放在头端，滴两滴缓冲的溶液，然后观察其中几滴，两个条是阳性的。
